مقدمة إلى وسائط الثقافة الميكروبية الشائعة (I)

مقدمة إلى وسائط الثقافة الميكروبية الشائعة (I)

وسط الاستزراع هو نوع من مصفوفة المغذيات المختلطة التي يتم إعدادها بشكل صناعي من مواد مختلفة وفقًا لاحتياجات النمو الميكروبي المتنوع، والتي تستخدم في استزراع أو فصل الكائنات الحية الدقيقة المختلفة.ولذلك، يجب أن تحتوي مصفوفة المغذيات على العناصر الغذائية (بما في ذلك مصدر الكربون، ومصدر النيتروجين، والطاقة، والملح غير العضوي، وعوامل النمو) والمياه التي يمكن أن تستخدمها الكائنات الحية الدقيقة.اعتمادا على نوع الكائنات الحية الدقيقة والغرض من التجربة، هناك أنواع مختلفة وطرق إعداد وسائل الثقافة.

يتم تقديم بعض الوسائط الثقافية الشائعة في التجربة على النحو التالي:

وسط الأجار الغذائي:

يتم استخدام وسط الأجار المغذي لتكاثر وزراعة البكتيريا الشائعة، ولتحديد العدد الإجمالي للبكتيريا، والحفاظ على الأنواع البكتيرية والاستنبات النقي.المكونات الرئيسية هي: مستخلص لحم البقر، مستخلص الخميرة، الببتون، كلوريد الصوديوم، مسحوق أجار، الماء المقطر.يوفر الببتون ومسحوق اللحم البقري مصادر النيتروجين والفيتامين والأحماض الأمينية والكربون، ويمكن أن يحافظ كلوريد الصوديوم على الضغط الأسموزي المتوازن، والأجار هو مادة تخثر وسط الاستزراع.

الآجار الغذائي هو النوع الأساسي من وسط الاستزراع، والذي يحتوي على معظم العناصر الغذائية اللازمة لنمو الميكروبات.يمكن استخدام الأجار الغذائي للثقافة البكتيرية الروتينية.

وسط أجار الدم:

وسط أجار الدم هو نوع من وسط الببتون المستخلص من لحم البقر الذي يحتوي على دم حيواني منزوع الرجفان (دم الأرانب أو دم الأغنام بشكل عام).ولذلك، بالإضافة إلى العناصر الغذائية المختلفة اللازمة لزراعة البكتيريا، فإنه يمكن أيضًا توفير الإنزيم المساعد (مثل العامل الخامس)، والهيم (العامل العاشر) وعوامل النمو الخاصة الأخرى.لذلك، غالبًا ما يتم استخدام وسط زراعة الدم لزراعة وعزل والحفاظ على بعض الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض التي تتطلب التغذية.

وبالإضافة إلى ذلك، عادة ما يستخدم أجار الدم لاختبار انحلال الدم.أثناء عملية النمو، يمكن لبعض البكتيريا إنتاج الهيموليزين الذي يكسر خلايا الدم الحمراء ويذيبها.عندما تنمو على صفيحة الدم، يمكن ملاحظة حلقات انحلالية شفافة أو نصف شفافة حول المستعمرة.ترتبط القدرة المرضية للعديد من البكتيريا بخصائص الانحلالي.نظرًا لاختلاف الهيموليزين الذي تنتجه البكتيريا المختلفة، فإن القدرة الانحلالية مختلفة أيضًا، كما تختلف ظاهرة انحلال الدم في لوحة الدم.ولذلك، غالبا ما يستخدم اختبار انحلال الدم لتحديد البكتيريا.

وسط TCBS:

TCBS عبارة عن وسط أجار ثيوكبريتات سيترات ملح السكروز الصفراوي.لعزل انتقائي للضمات المسببة للأمراض.يتم استخدام مستخلص الببتون والخميرة كعناصر غذائية أساسية في وسط الاستزراع لتوفير مصدر النيتروجين ومصدر الكربون والفيتامينات وعوامل النمو الأخرى اللازمة لنمو البكتيريا؛التركيز العالي لكلوريد الصوديوم يمكن أن يلبي احتياجات النمو المحبب للضمة.السكروز كمصدر للكربون المتخمر؛سترات الصوديوم والبيئة القلوية ذات درجة الحموضة العالية وثيوسلفات الصوديوم تمنع نمو البكتيريا المعوية.يمنع مسحوق الصفراء البقري وثيوكبريتات الصوديوم بشكل رئيسي نمو البكتيريا إيجابية الجرام.بالإضافة إلى ذلك، يوفر ثيوكبريتات الصوديوم أيضًا مصدرًا للكبريت.في وجود سترات الحديديك، يمكن الكشف عن كبريتيد الهيدروجين بواسطة البكتيريا.إذا كانت هناك بكتيريا منتجة لكبريتيد الهيدروجين، فسيتم إنشاء رواسب سوداء على اللوحة؛مؤشرات وسط TCBS هي أزرق البروموكريسول وأزرق الثيمول، وهي مؤشرات قاعدة حمضية.الأزرق Bromocresol هو مؤشر حمضي-قاعدي مع نطاق تغيير الأس الهيدروجيني من 3.8 (أصفر) إلى 5.4 (أزرق-أخضر).هناك نطاقان لتغير اللون: (1) نطاق الحمض هو درجة الحموضة 1.2 ~ 2.8، ويتغير من الأصفر إلى الأحمر؛(2) نطاق القلويات هو pH 8.0~9.6، ويتغير من الأصفر إلى الأزرق.

أجار ببتون فول الصويا بالجبن TSA متوسط:

تكوين TSA يشبه تكوين أجار المغذيات.في المعيار الوطني، يتم استخدامه عادةً لاختبار استقرار البكتيريا في الغرف (المناطق) النظيفة لصناعة الأدوية.حدد نقطة الاختبار في المنطقة المراد اختبارها، وافتح لوحة TSA وضعها عند نقطة الاختبار.يتم أخذ العينات عند تعرضها للهواء لمدة تزيد عن 30 دقيقة لأوقات مختلفة، ثم يتم زراعتها لعد المستعمرات.تتطلب مستويات النظافة المختلفة أعدادًا مختلفة للمستعمرات.

أجار مولر هينتون:

وسط MH هو وسط ميكروبي يستخدم للكشف عن مقاومة الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية.إنها وسيلة غير انتقائية يمكن أن تنمو عليها معظم الكائنات الحية الدقيقة.بالإضافة إلى ذلك، يمكن للنشا الموجود في المكونات أن يمتص السموم التي تفرزها البكتيريا، وبالتالي لن يؤثر على نتائج عملية المضاد الحيوي.تكوين وسط MH فضفاض نسبيًا، مما يفضي إلى انتشار المضادات الحيوية، بحيث يمكن أن يظهر منطقة تثبيط نمو واضحة.في صناعة الصحة في الصين، يتم استخدام وسط MH أيضًا لاختبار حساسية الدواء.عند إجراء اختبار حساسية الدواء لبعض البكتيريا الخاصة، مثل العقدية الرئوية، يمكن إضافة 5٪ من دم الأغنام و NAD إلى الوسط لتلبية المتطلبات الغذائية المختلفة.

أجار سس:

أجار SS عادة ما يستخدم للعزل الانتقائي وثقافة السالمونيلا والشيجيلا.فهو يثبط البكتيريا إيجابية الجرام، ومعظم القولونيات والمتقلبات، لكنه لا يؤثر على نمو السالمونيلا؛يتم استخدام ثيوكبريتات الصوديوم وسيترات الحديديك للكشف عن توليد كبريتيد الهيدروجين، مما يجعل مركز المستعمرة أسودًا؛اللون الأحمر المحايد هو مؤشر الرقم الهيدروجيني.المستعمرة المنتجة للحمض من السكر المتخمر حمراء، ومستعمرة السكر غير المتخمر عديمة اللون.السالمونيلا هي مستعمرة عديمة اللون وشفافة مع أو بدون مركز أسود، والشيجيلا مستعمرة عديمة اللون وشفافة.